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技術(shù)原理
DCFH-DA本身沒(méi)有熒光,可以自由穿過(guò)細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后,可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜,從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無(wú)熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測(cè) DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。
實(shí)驗(yàn)方法
Step1:細(xì)胞培養(yǎng)
Step2:轉(zhuǎn)染或藥物處理
Step3:細(xì)胞收集
Step4:加周期試劑
Step5:流式或熒光檢測(cè)
案例展示
免疫熒光和流式檢測(cè)ROS
實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn)
1. 實(shí)驗(yàn)周期:2-3周
2. 交付標(biāo)準(zhǔn):完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器等)
需確認(rèn)的信息
1. 樣本種屬及類型(組織或細(xì)胞)
2. 樣本數(shù)量
3. 是否提供探針