一、分子生物學(xué)平臺

1. 熒光定量PCR樣本收集運輸

A.細(xì)胞：

a.貼壁細(xì)胞

以6孔板培養(yǎng)的細(xì)胞為例，吸掉培養(yǎng)基，用PBS洗一次，吸掉PBS，加1ml  Trizol，將底部細(xì)胞吹打起來，轉(zhuǎn)入1.5mlEP管，裂解細(xì)胞。-80度凍存，干冰運輸。

b.懸浮細(xì)胞

將培養(yǎng)基及細(xì)胞轉(zhuǎn)入1.5 mLEP管，5000轉(zhuǎn)3 min離心，離心完吸掉上清，加1 mL  Trizol，吹打混勻，裂解細(xì)胞。-80度凍存，干冰運輸。

c.貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞混合

將底部細(xì)胞吹打起來，轉(zhuǎn)入1.5 mL EP管，5000轉(zhuǎn)3 min離心，離心完吸掉上清，加1 mL  Trizol，吹打混勻，裂解細(xì)胞。-80度凍存，干冰運輸。

B.組織：

客戶提供的組織，質(zhì)量請勿低于100 mg，約黃豆粒大小，可直接-80度凍存，干冰運輸，也可加入1 mL Trizol后，再行-80度凍存，干冰運輸

C.骨類:

液氮條件下粉碎，之后再加入1 mL Trizol研磨，-80度凍存，干冰運輸。

D.其他形式樣本:

a.血清、血漿、尿液樣本

請?zhí)峁┲辽? mL樣本；請在采集樣本時立即加入專&用trizol，推薦使用invitrogen公司的Trizol LS

該產(chǎn)品的使用比例為樣本體積：Trizol體積=1:3。-80度凍存，干冰運輸。液體樣本不建議直接凍存，請一定在采集樣本時加入專&用trizol再行凍存寄送。

b.全血

新鮮抗凝全血，按照1:3加入1×紅細(xì)胞裂解液，裂解10 min，12000 轉(zhuǎn)3 min離心，倒掉廢液，留存管底外周血單個核細(xì)胞沉淀，加1 mL  Trizol，吹打混勻，-80度凍存，干冰運輸。

2.ELISA/生化檢測樣本收集運輸

(1) 組織樣品：黃豆粒大小組織樣本，凍存，低溫液氮或干冰運輸。

(2) 血清 24小時內(nèi)處理：全血樣品于室溫放置2h或4℃靜置過夜，1000 r/min離心20 min，取上清待測。

(3) 血漿 24小時內(nèi)處理：用抗凝管收集血樣或往血樣品中加抗凝劑，1000 r/min離心15 min，取上清待測。

(4) 細(xì)胞培養(yǎng)上清：取細(xì)胞培養(yǎng)上清1000 r/min離心20 min，取上清待測。

(5) 其他液體樣品 如尿液，透析液等 ：1000 r/min離心20 min，取上清待測。

注意：

a.樣品處理后的上清可-20℃保存1個月或-80℃保存6個月；

b.如果取得上清比較渾濁,可稍微提高轉(zhuǎn)速將上清再次離心。

二、Western Blot平臺

1.樣本種類

細(xì)胞 、動物組織如心、肝、脾、肺、腎、胰、角膜、血管、脊髓、腦等

2.樣本收集

(1)組織樣本：

客戶提供的組織，質(zhì)量請勿低于100 mg，約黃豆粒大小，可-20度凍存，干冰運輸。

(2)細(xì)胞樣本：

a．貼壁細(xì)胞，數(shù)量不低于1*10^6個，將細(xì)胞用胰酶消化下來轉(zhuǎn)入EP管，5000 rpm離心3 min，去上清，加入1 mLPBS重懸后轉(zhuǎn)入新的1.5 mL EP管中，5000 rpm離心3 min，去上清后，PBS再次洗滌一次，留取細(xì)胞沉淀，-20℃保存，干冰運輸。

b．懸浮細(xì)胞，數(shù)量不低于1*106個，將培養(yǎng)基及細(xì)胞轉(zhuǎn)入EP管，5000 rpm離心3 min，去上清，加入1 mL PBS重懸后轉(zhuǎn)入新的1.5 mL EP管中，5000 rpm離心3 min，去上清后，PBS再次洗滌一次，留取細(xì)胞沉淀，-20℃保存，干冰運輸。

(3)蛋白樣本：

客戶自己提取好的蛋白樣本，蛋白濃度應(yīng)不低于2 μg/μl，-20℃保存，干冰運輸。

三、細(xì)胞平臺

1.活細(xì)胞

加滿培養(yǎng)基；用不透氣培養(yǎng)瓶；常溫或4℃運輸；培養(yǎng)瓶外用自封袋給予包裝；細(xì)胞量在60-80%為宜；快遞最好能在2天內(nèi)到貨；

2.凍存細(xì)胞

干冰運輸，最好提供2管凍存細(xì)胞。

注意：

a.凡是需要我司進行培養(yǎng)的細(xì)胞都要求無菌；

b.直接實驗的細(xì)胞必須保證細(xì)胞量；

c. 流式檢測的細(xì)胞須告知是否攜帶有熒光標(biāo)記。

四、病理學(xué)平臺

1. 常規(guī)病理樣本

(1)固定樣本：

a.取材后立即固定，固定時間超過半年的樣本做免疫組化或免疫熒光效果可能不好；

b.固定液體積至少為組織5倍以上，灌注固定的組織除外；

c.業(yè)務(wù)員對于客戶組織的最終包埋切面要問詢清楚，如果溝通不清楚可以當(dāng)場給技術(shù)員電話讓技術(shù)員跟客戶溝通清楚是否可以達(dá)到客戶要求，或者將客戶樣本取回讓技術(shù)員看到樣本后再跟客戶進行細(xì)節(jié)溝通；

d.固定好的組織只能放在常溫或4度冰箱保存，絕不能放在-20度冰箱保存； e. 如果現(xiàn)場驗視客戶組織樣本處理不符合處理標(biāo)準(zhǔn)，如有的組織外觀破爛不完整，包埋切片后達(dá)不到客戶要求，要當(dāng)場給客戶說明不能接收；

(2)蠟塊：

取樣時跟客戶核對清楚蠟塊數(shù)量，常溫運輸；

(3)石蠟切片：

a.石蠟切片的保存與運輸條件為常溫或4度。

b.玻片應(yīng)用專&用的盒子裝好，并固定，避免運輸過程中切片碎掉；

2. 透射電鏡樣本

(1)組織樣本：

取材時應(yīng)盡可能小，一般要求米粒大小，取材后立即用2.5%戊二醛或電鏡專&用固定液固定，4℃保存，不可常溫或冰凍保存，運輸過程中應(yīng)加入冰袋，且避免樣本與冰袋直接接觸；

(2)細(xì)胞樣本：

細(xì)胞量要求1*106個，細(xì)胞消化離心后轉(zhuǎn)移至1.5 mLEP管，PBS洗3遍后棄去PBS，向細(xì)胞沉淀中加入1 mL 2.5%戊二醛或電鏡專&用固定液，然后輕輕將細(xì)胞沉淀吹散，4℃保存，不可常溫或冰凍保存，運輸過程中應(yīng)加入冰袋，且避免樣本與冰袋直接接觸；

3. 抗體

(1)一抗的運輸條件為4度冰盒運輸；

(2)二抗及二抗試劑盒的運輸條件為4度冰盒運輸；

(3)若客戶提供的一抗種屬來源不是大鼠、小鼠、兔、山羊，則需要客戶提供對應(yīng)的二抗。